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          微流體芯片檢測(cè)microRNAs

          發(fā)布時(shí)間: 2013-03-13  點(diǎn)擊次數(shù): 1608次

                      該測(cè)試由日本理化研究所(RIKEN) 的Kazuo Hosokawa和他的同事們共同開發(fā),它是一種自供電的微流體芯片,能對(duì)一滴患者血液中的癌癥特異microRNAs進(jìn)行分析,分析時(shí)間只要20分鐘即可.如果有足夠的靶標(biāo)microRNA存在,芯片就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)熒光信號(hào),該信號(hào)可以被熒光顯微鏡檢測(cè)到.該小組開發(fā)的微流體芯片是很便宜的,它依賴于一個(gè)內(nèi)部壓力梯度將樣本泵過微通道,因此不需要外部電源,使系統(tǒng)非常適合用于實(shí)際的即時(shí)疾病診斷.然而以前版本的芯片只能在microRNA濃度遠(yuǎn)高于早期癌癥檢測(cè)所需的濃度時(shí),才能夠檢測(cè)到它們.
           

                       在他們zui近的工作中,Hosokawa和他的同事們?cè)黾恿岁栃詼y(cè)試產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度,從而增加了該芯片的靈敏度.zui初的芯片是將靶microRNA固定在主要微通道的DNA探針上,在主要微通道上,每一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)都會(huì)產(chǎn)生一個(gè)熒光信號(hào).在這一新的芯片中,研究人員加入了一個(gè)熒光放大過程,他們使用兩個(gè)增強(qiáng)試劑通過固定化的microRNA.這兩個(gè)試劑分別為一個(gè)熒光標(biāo)簽和一個(gè)分支連接子,能結(jié)合固定化的microRNA形成樹狀的樹突結(jié)構(gòu),可以使熒光信號(hào)增強(qiáng)至1000倍.利用這種增強(qiáng)處理,研究人員能夠改善該設(shè)備的靈敏度,使檢測(cè)水平接近早期癌癥檢測(cè)所需要的microRNA濃度.該小組下一步的任務(wù)是更進(jìn)一步的簡(jiǎn)化設(shè)備,如用一些其他類型的標(biāo)記物來去除熒光顯微鏡的使用.“這是未來發(fā)展的一個(gè)非常重要的方向.”Hosokawa說:“我們計(jì)劃使用不同的標(biāo)記材料替代熒光染料,例如膠體金顆粒,因?yàn)樗梢杂萌庋塾^察.”該小組還正在努力尋找提高該技術(shù)靈敏度的方法.

           

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